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技術文章 / article
人結腸癌細胞株的細胞形態是不太規則的三角形
原載自：m.008580.com[技術資料頻道] 2016-12-05 瀏覽次數：2135
人結腸癌細胞株是一種成團、貼壁生長的細胞,如果狀態好的情況下,生長非常快，細胞形態是不太規則的三角形.在低濃度時，此細胞長梭型（不好描述），高濃度時長成一張地毯，后者才是狀態的。.
收到人結腸癌細胞株atcc后，取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。
(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：
1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱，然后又將培養瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸出，分到新的培養瓶中。一傳二。
因時間及溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養基的瓶子里生長的狀態和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題（如：比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養基瓶子里面，會發生大片的脫落）。人結腸癌細胞株在低于正常生長溫度情況下，會調整為靜止期，或者慢速生長期，必須恢復37度的環境至少3個小時左右，才能重新調整到接近對數生長期的狀態。
